現(xiàn)代生物醫(yī)學研究中為了更好地理解人體生命的作用過程和疾病的產(chǎn)生機理，需要觀察細胞內(nèi)細胞器、病毒、寄生蟲等在三維細胞空間的精確定位和分布．另一方面，后基因組時代蛋白質(zhì)科學的研究也要求闡明：蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)、定位與功能的關(guān)系以及蛋白質(zhì) - 蛋白質(zhì)之間發(fā)生相互作用的時空順序；生物大分子，主要是結(jié)構(gòu)蛋白與 RNA 及其復(fù)合物，如何組成細胞的基本結(jié)構(gòu)體系；重要的活性因子如何調(diào)節(jié)細胞的主要生命活動，如細胞增殖、細胞分化、細胞凋亡與細胞信號傳遞等．反映這些體系性質(zhì)的特征尺度都在納米量級，遠遠超出了常規(guī)的光學顯微鏡(激光掃描共聚焦顯微鏡等)的分辨極限(xy 向分辨率：200 nm，z 向分辨率：500 nm)。 應(yīng)用傳統(tǒng)的電子顯微鏡(EM)可以達到納米量級的分辨率，能夠觀察到細胞內(nèi)部囊泡、線粒體等細胞器的定位，但是由于缺乏特異性的探針標記，不適合定位單個蛋白質(zhì)分子，也不適合觀察活細胞和細胞膜的動態(tài)變化過程．因此，生物學家迫切希望有一種實驗顯微方法，它既具有亞微米甚至納米尺度的光學分辨本領(lǐng)，又可以連續(xù)監(jiān)測生物大分子和細胞器微小結(jié)構(gòu)的演化，而并不影響生物體系的生物活性。 近年來，隨著新型熒光分子探針的出現(xiàn)和成像方法的改進，光學成像的分辨率得到極大的改進，達到可以與電子顯微鏡相媲美的精度，并可以在活細胞上看到納米尺度的蛋白質(zhì)[2～5]． 這些技術(shù)上的進步勢必極大地推動生命科學的發(fā)展，為了增強生物學家對于超分辨率熒光顯微成像(super-resolutionfluorescent microscopy)機理的理解，以下我們將介紹傳統(tǒng)的熒光顯微成像的極限，突破此極限超分辨率成像的原理以及目前國際上的最新進展。